he染色原理是什么
he染色原理是易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性和嗜酸性 。对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性 。组织内的蛋白质构成蛋白质的氨基酸的种类很多 , 它们有不同的等电点 。
在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右 , 细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性 。
细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型 。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性 。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应 。
he染色方法什么叫he染色法呢1.苏木精伊红染色法,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。
【he染色原理是什么,he染色方法什么叫he染色法呢】2.苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质和胞质内的核酸着紫蓝色 。
3.伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。
4.HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学和科研中最基本、使用最广泛的技术方法 。
5.原理:易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性和嗜酸性 。
6.而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性 。
he染色的实验原理方法及注意事项是什么HE染色全名为苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色方法 , 是最基本的也是最重要的病理学染色技术 。
HE染色是目前国内外病理诊断上广泛采用的 常规染色方法 。一张好的HE切片是保证正确病理诊断的关键 。切片质量的好坏,可直接影响疾病诊断的及时与准确性 。作为一个合格的实验技术员,能制作出一张高质量的HE染色切片 , 是必须掌握的一门重要功课 。
HE染色的实验原理及注意事项
一、细胞核染色原理:
苏木精为碱性天然染料 , 可使细胞核着色 。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外 , 使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色 。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色 。
二、细胞浆染色原理:
细胞浆内主要成分是蛋白质 , 为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系,当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时,胞浆对外不显电性,此时酸或碱性染料不易染色 。当pH调到6.7-6.8时,大于蛋白质的等电点pH值 , 表现酸性电离,而带负电荷的阴离子 , 可被带正电荷的染料染色 , 现时胞核也被染色,核和胞浆难以区分 。因此必须把pH调至胞浆等电点以下,在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷(阳离子),就可被带负电荷(阴离子)的染料染色 。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阳离子)结合而使细胞浆染色 , 细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织,嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红色或粉红色 , 与蓝色的细胞核形成鲜明的对比 。
三、分化作用:
染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液 。在HE染色中用0.5%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木精的醌型结构,使组织与色素分离而褪色 。经苏木精染色后,必须用0.5%盐酸乙醇分化 , 使细胞核过多结合的苏木精染料和细胞浆吸附的苏木精染料脱去,在进行伊红染色 , 才能保证细胞核与细胞浆染色的分明 。因此,在HE染色中分化是极为关键的一步 。
四、返蓝作用:
分化之后,苏木精在酸性条件下处于红色离子状态 , 呈红色,在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色 。组织切片经0.5%盐酸乙醇分化后呈红色或粉红色,故分化之后,立即用水除去组织切片上的酸而终止分化,再用弱碱性水(0.2%氨水)使苏木精染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用 。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长 。
实验材料
固定液:常用95%乙醇和冰丙酮
苏木精染液:称取苏木精粉0.5g , 铵矾24g溶解于70ml蒸馏水中,然后取NaIO 31g,水5ml,再加入甘油30ml和冰醋酸2ml,混合均匀,滤纸过滤,备用 。
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