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he染色原理是什么，he染色方法什么叫he染色法呢( 二 )

生活经验HE


伊红染液：称取0.5g水溶性伊红染液，溶于100ml蒸馏水中 。
稀盐酸乙醇溶液：用75%乙醇配制1%盐酸 。
系列浓度的乙醇、二甲苯、中性树胶 。
培养瓶、培养皿、眼科镊、盖玻片、载玻片、显微镜 。
实验步骤
样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化 ， 调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上(置于6孔板中)，培养相应时间后，取出细胞爬片 ， 用PBS 洗涤3次 。
样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min 。
染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤 。
分色：镜下观察 ， 若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤 。
染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤 。
吹干或自然晾干细胞 爬片后，中性树胶封片 。
若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min ， 伊红5min即可 。
实验结果及注意事项
** 实验结果**
细胞核呈蓝色，细胞质 ， 肌纤维，胶原纤维和红细胞呈不同程度的红色 。钙盐和细菌可呈蓝色或紫蓝色
注意事项：
1. 染色时调节pH值很重要 。如果组织块在福尔马林中固定时间长，组织酸化而影响细胞核着色 。因此 ， 要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min，这样可以使细胞核着色较深 。染伊红时胞浆着色不佳，可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸 。
2. 切片染苏木精后，分色这一步是关键，应在显微镜下控制进行，一般以细胞核染色清楚（晰）而细胞质基本无色为佳 。如果过分延长分色时间将导致染色太浅 ， 应重新染色后再行分色 。
3. 切片经酒精脱水后，入二甲苯时可出现白色不透明状态，此为脱水不彻底，应将切片退回无水酒精，更换酒精、二甲苯，以求彻底脱水与透明 。

he染色原理是什么，he染色方法什么叫he染色法呢

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