一颗跳动的小细胞|qPCR检测试剂盒,支原体筛查用
细胞培养时 , 支原体污染是一个常见的问题 , 它会带来如下危害 。
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由于支原体污染无法肉眼识别 , 因此应定期采用试剂盒对细胞培养物中的支原体进行监测 。
世界著名微生物控制公司MinervaBiolabs开发有Venor?Gem系列的支原体检测试剂盒(核酸法) , 灵敏度高 , 特异性好 , 广受科研和工业用户的欢迎 。
其中 , Venor?GemqOneStep , 即支原体荧光定量PCR检测试剂盒(一步法)适用于细胞培养物、细胞培养基及其他生物基质中的支原体污染的筛查(非放行检测) 。
和PCR比起来 , qPCR无需跑电泳 , 使用时更为便捷 , 对实验人员更安全 。
现对该试剂盒作一简单介绍:
一、产品信息
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二、产品描述
试剂盒包含有1管预混液 。 预混液内含引物对、核苷酸、内控对照和聚合酶 。 另含有1管阳性对照DNA 。 两管均为冻干粉 , 使用时复溶即可 。 整个qPCR检测小于3小时 。
三、产品特点
①内控对照已加在预混液中 , 无需另外配制 , 使用便捷 。
②高特异性 , 一次检测即可涵盖所有常见易感染细胞的支原体物种(包括欧洲药典规定的9种支原体) 。 与细菌和真核DNA无交叉反应 。
③高灵敏度 , 至少50个基因组拷贝/反应 。
四、操作步骤
第1步:样本处理
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第2步:试剂制备
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第3步:qPCR体系建立
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第4步:启动qPCR反应
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第5步:结果判别
FAM通道:检测支原体荧光信号 。
HEX通道:检测内控对照荧光信号 。
支原体DNA和内控DNA存在信号的竞争性抑制 。
支原体DNA越多 , FAM通道信号越高 , 检测内控对照的HEX通道信号越低 。
定量需基于Ct值和DNA标准曲线 。
Ct<40为阳性结果 。 Ct≥40为阴性结果 。
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示意图:
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