新冠病毒■新冠病毒能存活多久?空气中3小时,塑料和不锈钢上长达2至3天!( 二 )
研究方法
HCoV-19 nCoV-WA1-2020 (MN985325.1)和SARS-CoV-1 Tor2 (AY274119.3)是研究人员比较使用的菌株。病毒在气溶胶中的稳定性被确定为65%相对湿度(RH)和21-23℃。简而言之,气溶胶(< 5μm)包含HCoV-19 (105.25 TCID50/mL)或SARS-CoV-1 (106.75-7 TCID50/mL),使用3嘴Collison喷雾器和送入Goldberg大桶来创建一个雾化环境。在Goldberg大桶中保留气溶胶,并在气溶胶化后的0、30、60、120和180分钟用47mm明胶过滤器(Sartorius)收集样本。过滤器溶解在10ml含有10%胎牛血清的DMEM中。实验重复进行了三次。
对塑料(聚丙烯、ePlastics)、AISI 304合金不锈钢(金属残留物)、铜(99.9%)(金属残留物)和硬纸板(本地供应商)的表面稳定性进行了评估,这些材料代表了各种家庭和医院的情况,如前所述,使用105 TCID50/mL的接种物,在40%相对湿度(RH)和21-23℃条件下进行。该接种物的循环阈值(Ct)在20到22之间,与在人体上呼吸道和下呼吸道样本中观察到的值相似。简而言之,把50μl病毒沉积在表面,通过添加1毫升的DMEM在预定的时间点恢复。通过在表面上沉积50 μl病毒并通过擦拭表面回收接种物来评估纸板的稳定性,将拭子沉积1 mL DMEM。对每个表面进行三个重复实验。然后通过在Vero E6细胞上进行末端滴定来定量所有表面和气溶胶样品中的活病毒。对于塑料,钢铁和硬纸板,分析的检测下限(LOD)为100.5 TCID50 / mL,对于铜则为101.5 TCID50 / mL(由于未稀释样品中的铜引起的毒性)。
如预期的那样,可检测性的持续时间取决于初始接种物和采样方法。 为了评估病毒的固有稳定性,研究人员使用贝叶斯回归模型估算了活病毒滴度的衰减率。这种建模方法使其能够解决重复样本中初始接种物水平的差异,以及滴度数据和其他实验噪声源的间隔检查。 该模型可得出各种实验条件下病毒衰减率和半衰期的后验分布估计值,即,根据数据,估计这些参数的合理值范围,并估计整体不确定性。
研究结果
在实验期间(180分钟),HCoV-19在气溶胶中保持活性,气溶胶化后3小时的感染性滴度从103.5下降到102.7 CID50/L(取三次重复实验的平均值)。活病毒滴度的降低与在含有SARS-CoV-1的气溶胶中观察到的降低相类似,从104.3下降到103.5 TCID50/mL(取三次重复实验的平均值)(图1A)。
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图1(AB)
HCoV-19在塑料和不锈钢上最稳定,在使用后最高72小时能可检测到活病毒(图1B),尽管那时病毒效价大大减少(72小时后,聚丙烯从103.7下降到100.6 TCID50/mL;48小时后,不锈钢从103.7下降到100.6 TCID50/mL,取三次重复实验的平均值)。SARS-CoV-1具有相似的稳定性,可在聚丙烯表面72小时和不锈钢表面48小时检测到活病毒(72小时后,检测到聚丙烯从103.4下降到100.7 TCID50/mL,48小时后检测到在不锈钢从 103.6下降到100.6 TCID50/mL,取三次重复实验的平均值)。HCoV-19和SARS-CoV-1分别在铜上放置4小时和8小时,或HCoV-19和SARS-CoV-1 110分别在纸板上放置24小时和8小时后,均无检测到活病毒(图1B)。
所有实验条件下,两种病毒的活病毒滴度均呈指数衰减,log10TCID50/mL随时间呈线性下降(图2A)。研究人员还计算了每种病毒在每种情况下的半衰期的后验分布(图2B,表1)。
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图2(AB)
在气溶胶中,HCoV-19和SARS-CoV表现出类似的半衰期,中位数估计约2.7小时,95%可信区间(2.5% -97.5%分位数范围),HCoV-19 为(1.65,7.24小时),SARS-CoV-1 为(1.81,5.45小时) (表1)。两种病毒在铜上的半衰期也相似。
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表1
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