ms培养基的配制步骤,配制培养基的步骤?


ms培养基的配制步骤,配制培养基的步骤?

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本篇文章给大家谈谈培养基的配制步骤,以及ms培养基的配制步骤对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站!
内容导航:
  • 配制培养基有哪几个步骤?在操作过程中应注意些什么问题?为什么?
  • 培养基制备有几个主要步骤
  • 微生物培养基配置的基本步骤?
  • 配制培养基的基本步骤有哪些?应注意什么问题
  • 配制培养基的步骤?
  • 培养基怎么配置
Q1:配制培养基有哪几个步骤?在操作过程中应注意些什么问题?为什么?1、培养基配方的选定
同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别 。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源 。
2、培养基的制备记录
每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱 。
3、培养基成分的称取
培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,最好一次完成,不要中断 。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方面军做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧 。完全称取完毕后,还应进行一次检查 。
4、培养基各成份的混合和溶化
培养基所用化学药品均应是化学纯的 。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长 。最好使用不锈钢莴加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化 。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备 。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸 。如为琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合 。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,最后必须加以补足 。
5、培养基pH的初步调正
因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,培养基各成分完全溶解后,应进行PH的初步调正 。例如,牛肉浸液约可降低pH0.2,而肠浸液pH却会有显著的升高 。因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终PH,保证培养基的质量 。PH调整后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出 。
6、培养基的过滤澄清
液体培养基必须绝对澄清,琼脂培养基也应透明无显著沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求 。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应折叠成折扇或漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂 。
琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤 。亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤 。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去,再用滤纸反复过滤 。如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法 。即将冷却至55~60°C的培养基放入大的三角烧瓶内,装入量不得超过烧瓶容量的1/2,每1000ml培养基加入1~2个鸡蛋的蛋白,强力振摇3~5分钟,置高压蒸汽灭菌器中、121°C加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可 。
7、培养基的分装
培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内 。分装量不得超过容器装盛量的2/3 。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者) 。分装时最好能使用半自动或电动的定量分装器 。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当 。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌 。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基最终pH之用 。
8、培养基的灭菌
一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法 。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌 。
某些畏热成分,如糖类,应另行配成20%或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基 。明胶培养基亦应用较低温度灭菌 。血液、体液和抗生素等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50°C左右的培养基中 。


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