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【疫苗】非洲猪瘟疫苗研发再进一步，哈兽研的实验突破是这样的！

《科创板日报》（上海 ， 采访人员 徐红）讯， 3月1日 ， 一则关于"非洲猪瘟疫苗创制成功"的消息再次引爆业界 。
据《中国科学》杂志社官方消息 ， 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（下称"哈兽研"）在SCIENCE CHINA Life Sciences（《中国科学：生命科学》英文版）发表了题为"A seven-gene-deleted African swine fever virus is safe and effective as a live attenuated vaccine in pigs"的研究论文 。
该论文显示 ， 研究人员以我国第一株非洲猪瘟病毒分离株Pig/HLJ/2018为骨架 ， 利用DNA同源重组技术 ， 通过删除1～7种不同蛋白质的基因片段构建了6种不同的重组病毒 。 这6种不同的重组病毒分别为：HLJ/18-6GD、HLJ/18-CD2v-del、HLJ/18-DP148R-del、HLJ/18-9GL&UK-del、HLJ/18-CD2v&UK-del、HLJ/18-7GD（见下图） 。
其中 ， HLJ/18-7GD有七个基因缺失 ， 分别敲除了编码MGF505-1R、MGF505-2R、MGF505-3R、MGF360-12L、MGF360-13L、MGF360-14L和CD2v的基因 。 据称 ， MGF505-1R、MGF505-2R、MGF505-3R、MGF360-12L、MGF360-13L、MGF360-14L、CD2v、9GL、DP148R和UK等不同的蛋白质此前已被证明对不同非洲猪瘟病毒的毒力有重要影响 。
【疫苗】非洲猪瘟疫苗研发再进一步，哈兽研的实验突破是这样的！
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图：摘自论文《A seven-gene-deleted African swine fever virus is safe and effective as a live attenuated vaccine in pigs 》而经系统实验室研究评价 ， 此前分离出的HLJ/18毒株（基因未有缺失）对猪有极高的致死率 ， 而在6款基因缺失毒株中 ， 人工缺失了7个基因的非洲猪瘟弱毒活疫苗HLJ/18-7GD对家猪（包括怀孕母猪）具有最好的安全性和有效性 ， 包括具有免疫原性、毒力返强风险较小等 。
与此同时 ， 论文研究团队还证明了该疫苗株可在SPF猪原代骨髓细胞高效培养 ， 一头健康仔猪的原代细胞能制备出至少20万头份的疫苗 ， 完全具备大规模生产条件 。
"这是个好消息 ， 离非洲猪瘟疫苗的成功创制与上市又近了一步 。 "一位业内专家如此评价道 。
自2018年8月沈阳发现我们国内第一起非洲猪瘟疫情以来 ， 虽然通过扑杀受感染的猪而使得疫情暂时得到控制 ， 但因为病毒已经大面积污染环境 ， 因此疫情仍有死灰复燃的可能 ， 没有有效疫苗则意味着整个产业仍将面临较大的威胁 。 所以 ， 业界对于非洲猪瘟疫苗的问世可谓是期盼已久 。
"（我们）非常急需疫苗 ， 这款疫苗的市场会非常巨大！"一名业内人士对《科创板日报》采访人员表示 。 据其称 ， 从18年8月开始出现疫情到18年底 ， 其所在地（某县）20多个百头存栏以上猪厂最终没有被非瘟疫情波及的不超过5个 。
"并且这个疫情比较凶猛 ， 很少有猪感染之后耐过 ， 即感染后能扛过去没死的 。 很多猪只要一开始不进食 ， 大部分当天就会出现耳朵或者身体发紫的症状 ， 然后三天内必死 。 "对方表示 。
据了解 ， 和非洲猪瘟类似 ， 猪蓝耳病也是曾经让业内闻之色变的猪传染病 ， 并重创国内生猪养殖产业 。 不过 ， 自蓝耳病疫苗问世后 ， 猪蓝耳病也得到了有效的控制 。 然而 ， 蓝耳病疫苗的发展历程并非一帆风顺 。
"蓝耳病疫苗早期主要是存在毒力返强及造成母猪流产两大问题 ， 让猪厂损失惨重 ， 但随着新的毒株的筛选及应用 ， 加上加工工艺改进等其他因素 ， 目前蓝耳病疫苗日趋完善 ， 对猪场蓝耳病的防控也起到了很大的作用 。 所以对于非瘟疫苗 ， 我们无非也就是担心毒力返强和母猪流产两大问题 。 "前述业内人士告诉采访人员 。 所谓毒力返强 ， 是指靶动物在接种疫苗（往往是减毒活疫苗）后 ， 原本被弱化的病毒毒力在动物体内增强并转换成致命毒株 ， 造成靶动物死亡 。
而从3月1号哈兽研的论文来看 ， 目前的实验室结果显示 ， HLJ/18-7GD在上述两个业内最关心的问题上均"表现出色" 。 论文表示 ， HLJ/18-7GD即使以最大剂量接种猪 ， 疫苗病毒也不能在实质器官复制 ， 不产生病毒血症 ， 仅在部分淋巴结内有限复制 ， 并且两周左右即被机体彻底清除 ， 因此无法在体内连续传代 ， "不存在毒力返强的风险" 。
此外 ， 该疫苗对怀孕母猪也具有良好的安全性 。 在母猪怀孕的早期、中期及晚期注射疫苗都不能造成流产现象 ， 免疫后分娩的仔猪健仔率与未免疫对照组也没有区别 。
值得注意的是 ， 哈兽研曾于2019年4月26日提交了一项发明专利申请 ， 专利名为"基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒及其作为疫苗的应用" 。
据专利文件描述 ， 该发明采用非洲猪瘟中国流行株Pig/CN/HLJ/2018 ， 经基因工程技术 ， 将非洲猪瘟病毒的毒力基因缺失 ， 获得MGF360-505R缺失和CD2V与MGF360-505R联合缺失（双基因缺失）的两种基因缺失病毒 。
"经实验表明 ， 所述两种毒株均能提供对非洲猪瘟中国流行强毒株的100%免疫保护 ， 可作为安全和有效的防控中国非洲猪瘟疫情的疫苗 ， 具有极大的社会价值 。 "该专利文件曾表示 。
经业内人士判断 ， MGF属于多基因家族 ， 因此此次报道的7基因缺失的HLJ/18-7GD其实就是之前专利中所提及的CD2v与MGF360-505R"双基因缺失"疫苗 ， MGF360-505R基因缺失疫苗即HLJ/18-6GD（六基因缺失） 。


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