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苯酚-硫酸法 果蔬中可溶性糖含量的测定( 二 )


m——样品质量,g 。
注意事项
(1)由于苯酚-硫酸法测定糖含量是受到多种因素的影响,重现性较差,所以在测定果蔬组织中糖含量时,对操作者要求很高 。最好始终一人操作，把每个细节都能固定下来 。要尽量多做平行实验，以减少个人操作习惯带来的误差 。
(2)利用苯酚-硫酸法测定可溶性糖对苯酚的要求很高 。最好利用经过重蒸馏、结晶的苯酚 。
(3)浓硫酸的纯度、滴加方式和速度，如直接加在液面上还是慢加等,都会对实验结果产生影响 。因此,操作方式一定要一致才能获得较好的重现性 。
(4)果实组织糖含量很高,在测定时应注意进行适当的稀释 。一般可以取1mL或10mL样品提取液，置于100mL容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,即将样品液稀释了100倍或10倍 。
一般先进行预实验，确定基本的实验条件 。一般情况下,反应后的混合液比色时，吸光度值都较高，为了使吸光度值读数处于适当的范围,应对提取液进行稀释,稀释后再进行反应、测定 。切忌对反应后的混合液进行稀释 。因为在反应后的混合液中硫酸:的浓度很高,稀释反应混合液时一方面会导致溶液放出大量的热,另一方面会导致反应混合液中硫酸浓度降低,引起混合液颜色变化 。在浓硫酸作用下,糖醛或羟甲基糠醛才能与苯酚缩合成的化合物呈橙红色(红棕色) 。而在稀硫酸中,该化合物的颜色将会发生变化 。
此外,稀释过程往往会使实验误差加大 。在具体操作时，一定要严谨、认真地进行 。
(5)样品中可溶性糖含量的测定过程必须与标准曲线的制作过程相同 。
(6)如果样品中含有较多葡萄糖，加热时间应延长至45min，因为葡萄糖显色较慢 。

苯酚-硫酸法 果蔬中可溶性糖含量的测定

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