可能很多朋友一看到反应曲线这四个字的时候 ， 都有一种抗拒心理 ， 觉得这个太难了 ， 看不懂 。 其实吧 ， 看懂生化反应曲线没想象中的那么难 。
一、反应曲线是什么？
炒菜 ， 应该大家都会吧？其实 ， 生化项目的检测过程跟炒菜比较相似 ， 炒菜的基本流程是：放油放菜放盐 ， 如果每隔18秒 ， 对菜的味道进行打分并记录 ， 再把各个点连接绘成一条曲线的话 ， 炒菜的反应曲线大致是这样的 ， 见下图：
文章插图
如果只是把油菜盐 ， 按顺序放进锅里 ， 这一锅菜应该是没法吃的 ， 对吧？至少得在放油、菜、盐的时候用锅铲搅拌混匀一下 ， 对吧？于是炒菜的反应曲线变成了这样 ， 见下图：
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那么 ， 对应的生化项目检测(以奥林巴斯AU系列为例)是这样的：首先 ， 仪器会向反应杯加入试剂1(R1) ， 紧接着加入样本(S) ，搅拌混匀 ， 3分钟后加入试剂2(R2) ， 搅拌混匀 。 在这个过程中 ， 仪器会每隔18秒测试一次吸光度并记录 ， 总共28(0-27)个点 ， 然后连接成线 ， 就是我们所看到的反应曲线 ， 见下图：
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所以 ， 反应曲线是项目检测整个过程的记录 ， 相当于是一个静态的录像 。
2、反应曲线怎么看？
在整个检测过程中 ， 试剂1(R1)、样本(S)、试剂2(R2)加入以及搅拌的时间点都是固定的 。 我们知道了反应曲线是怎么来的之后 ， 需要知道什么样的曲线算正常 。
一般正常的反应曲线
a.比较平滑 ， 无明显的跳点；
b.加入R2前后吸光度会发生明显的变化(低浓度样本除外)；
c.终点法的反应曲线 ， 会有一段曲线的吸光度基本无变化；
d.速率法的反应曲线 ， 基本成一条直线(两点速率法除外) 。
【反应曲线|生化反应曲线看不懂？只因方法没用对】生化的反应曲线可以分为终点法和速率法两大类 ， 以下列举了一些正常的反应曲线供参考：
1)终点法的反应曲线
反应到达终点后反应混合物的吸光度不再变化(R1主要用于消除干扰 ， R2加入之后 ， 反应启动) ， 就像你炒好的菜在一段时间内味道是不变的 。 如下图：
文章插图
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2)速率法的反应曲线
随着反应的进行 ， 吸光度越来越大 ， 但速率保持不变 ， R2之后基本成一条直线 ， 无明显跳点(两点速率法除外) ， 如下图：
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注：上图在加入R2之前为虚线 ， 是因为R1+S的体积小于仪器要求的最低的反应总体积 。
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我们在看反应曲线的时候 ， 眼里是一条曲线 ， 脑袋里面浮现的应该是整个的检测过程 ， 去还原仪器的动作 ， 分析从什么时候吸光度突然变得异常 。 你可以想象成这盘菜是怎么炒出来的 。
3、反应曲线有什么用 ，
什么时候用得着？
(1)结果出现负值(终点法项目)
a.反应曲线有可能是一条直线 ， 样本或R2有可能没有加入；
b. R2加入之前的吸光度比加入后还高 ， 试剂1和试剂2位置放反或者严重脂血标本 。
(2)结果明显偏低(速率法项目)
反应曲线可能变成了类似于终点法的曲线 ， 也就是我们通常说的底物耗尽 ， 需要稀释重测 。
(3)试剂过期或污染、搅拌棒破损、携带污染以及冲洗站滴水也会在反应曲线上有所体现 。
总之 ， 在结果比较可疑的情况下 ， 可以调出反应曲线看看是否正常 ， 有助于找出问题所在 。
4、注意事项
1)不同厂家或型号的仪器 ， 加入样本和试剂的顺序可能不同 ， 比如 ， 日立是S+R1+R2 。
2)部分仪器横坐标是直接用时间表示 ， 比如贝克曼LX/Dxc系列用的是秒 ， 另外LX/Dxc系列的加样顺序有可能是R1+S+R2或者R1+R2+S 。
3)部分仪器没有把各个点连接起来 ， 所以看到的是由点组成的曲线 。
4)看反应曲线时 ， 注意纵坐标的刻度 ， 就像远看是美女 ， 近看就不一定了 。
5)反应曲线界面还可以看到很多的信息 ， 比如：光电校正、试剂空白、定标的时间以及每一点的吸光度 ， 这些都会有助于判断结果异常的原因 。
所以 ， 你应该已经意识到 ， 当有人问为什么某项目的结果偏低、不正常时 ， 仅凭一个结果是很难判断的 。
5、其他
临床医生在诊断病情时一般会参考各科的检验报告单 ， 反应曲线相当于是检验科判断结果准确性的“检验报告单” 。 在遇到可疑的结果时 ， 建议大家调出反应曲线看看 。 另外 ， 其他仪器也有类似的功能 ， 比如：糖化有层析图 ， 血球仪有散点图等 。 希望大家能够用好各种仪器提供的“检验报告单” ， 提高工作效率 。
来源：检验视界网
编辑：小冉审校：Rose
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